接种环以菌操作沾取少许待分离的材料，在无平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，洗衣房设备可在平板表面得到单菌落。用途：段多用于从菌种的纯化；优点：可以观察菌落特征，对混合菌进行分离；革兰氏染色镜检4.1原理：革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要状。它是1 884年由丹麦医师bram创立的。革兰氏染色法不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类：细菌对于革兰氏染色的不同反应，是由于它们斡哩譬的成分和结构不同而造成的。染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G+表示；其细胞壁主要是由肽聚糖形成的网状结构组成的，在染色过程中，当用乙醇处理时，由于脱水而引起网状结构中的孔径变小，通透性降低，使结晶紫—碘复合物被留在细胞内而不易脱色，因此，呈现蓝紫色。强度较韧，厚度约20—80nm，肽聚糖层多，可达50层，呈三结构，肽聚糖量，外膜—，脂多糖—，脂蛋白—，致病性菌多产生外毒素，对青霉素敏感。染色反应呈红色（复染颜色）的称为革兰氏阴性细菌，用G-表示：k聚糖含量低，而脂类物含量高，当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁的通透性增加，使结晶紫—碘复合物易被乙醇抽出而脱色，又被染上了复染液（番红）的颜色，因此呈现红色。强度较疏松，较薄，5 N 10nm，肽聚糖层数少，1～3层，呈二维结构肽聚糖含量少，磷壁酸一，外膜+，脂蛋白十，脂多糖十，致病性多产生内毒素，药敏对链霉素等敏感。片、初染（结晶紫染色Imin）、媒染（碘液媒染约1min）、脱色（95%的乙醇脱色）、复染（番红液复染约] N 2min）了洗，然后用吸水纸吸干。在染色的过程中，不可使染液干涸、镜检。